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〔含量測(cè)定〕酸性羧甲基纖維素酶活力對(duì)照品溶液的

制備取無(wú)水葡萄糖對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加水制成每lml

含3mg的溶液，即得。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取對(duì)照品溶液L 0ml、2。0ml、

4. 0ml、6. 0ml、8。0ml，分別置10ml量瓶中，各加水至刻度，搖__

勻。分別精密量取上述溶液各0= 5mU置25ml具塞刻度試管

中，精密加入枸櫞酸鹽緩沖液（pH t 8)1。5mU混勻，立即精密

加人3，5-二硝基水楊酸試液1。5ml，搖勻5置沸水浴中保溫15

分鐘，取出，置冰水浴中冷卻10分鐘，再加水至刻度，搖勻，靜

置90分鐘，以相應(yīng)的試劑為空白，照紫外-可見(jiàn)分光光度法

(通則0401)，在540nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐

標(biāo)，葡萄糖量（mg)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

測(cè)定法取本品約LOg，精密稱(chēng)定9置具塞錐形瓶中，精

密加水100ml，密塞，旋轉(zhuǎn)振搖（轉(zhuǎn)速每分鐘200轉(zhuǎn)）6 0分

鐘，濾過(guò)，作為供試品溶液（本液應(yīng)臨用新制）。精密量取

1%羧甲基纖維素鈉溶液1。5ml，置25ml具塞刻度試管中，

精密加人供試品溶液0. 5mU混勻5置50°C水浴中保溫30分

鐘，取出n照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，自“立即精密加人3，

5-二硝基水楊酸溶液L 5011”起5依法測(cè)定吸光度5從標(biāo)準(zhǔn)曲

線上讀出供試品溶液中含還原糖的重量（mg)。空白管加

入1%羧甲基纖維素鈉溶液1。5ml，置50°C水浴中保溫30

分鐘，取出，立即精密加人3，5-二硝基水楊酸試液L 5ml9

搖勻，精密加人供試品溶液0。5ml，混勻，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

項(xiàng)下的方法，自“置沸水浴中保溫1 5分鐘”起，依法進(jìn)行。

按下式計(jì)算：

X = A X l /0 . 5X100/W八 1一水分）X2

式中X— 酸性羧甲基纖維素酶活力，U /gl

A— 吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的還原糖量，mg;

W— 取樣量

2— 時(shí)間換算系數(shù)。

l g 固體酶在50°C±l°C、pH4. 8 條件下，1 小時(shí)水解1%

羧甲基纖維素鈉底物，產(chǎn)生出相當(dāng)于lm g葡萄糖的還原糖量

為一個(gè)酸性羧甲基纖維素酶活力單位，以U /g表示。

本品按干燥品計(jì)算，每l g 含酸性羧甲基纖維素酶活力不

得低于150U。

注：[1]3,5-二硝基水楊酸試液：取苯酚6。9g，加10% 氫

氧化鈉溶液15ml使溶解，用水稀釋至70ml，搖勻，再加亞硫

酸氫鈉6. 9g，振搖使溶解（甲液取酒石酸鉀鈉255g，加

10%氫氧化鈉溶液300ml使溶解，再加1%的3，5-二硝基水

楊酸溶液880ml9搖勻（乙液）；將甲液與乙液混合5搖勻，得黃

色的溶液，貯于棕色瓶中，4°C放置7 天，備用。

[2]構(gòu)櫞酸鹽緩沖液（pH 4. 8) :分別精密量取0. 5mol/L

枸櫞酸溶液60ml、0. 5mol/L枸櫞酸三鈉溶液100ml，混勻，精

密量取上述溶液100ml，加水800ml,以3mol/L鹽酸溶液或

3mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)p H 值至4。8，移至1000ml量瓶

中，加水至刻度，搖勻，即得。

[3]1%羧甲基纖維素鈉溶液；精密稱(chēng)取l .O g羧甲基纖維

素鈉，置具塞錐形瓶中，精密加入枸櫞酸鹽緩沖液（PH4. 8)

80ml，稱(chēng)定重量，85°C±5°C邊加熱邊磁力攪拌至*溶解，

放冷，再稱(chēng)定重量，用枸櫞酸鹽緩沖液（PH4. 8)補(bǔ)足減失的重

量，搖勻，以3mol/L鹽酸溶液或3mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)

p H值至4. 8，移至100ml量瓶中，加枸櫞酸鹽緩沖液

(pH4.8)至刻度9搖勻，即得。